Präparative HPLC
1. Einführung
Die Präparative HPLC wird verwendet, um hochreine Zielverbindungen nach einer Synthesereaktion aus einer Mischlösung oder aus natürlichen Extrakten zu trennen und zu verfeinern. Ein präparatives HPLC-System muss andere Fähigkeiten mitbringen als ein normales Analysesystem. Es wird verwendet, um hochreine (und in einigen Fällen große Mengen von) Verbindungen zu fraktionieren, die in kürzester Zeit für die nachfolgende Bewertung, Analyse und Prozesse erforderlich sind. Diese Seite vermittelt das Wissen, das erforderlich ist, um ein geeignetes präparatives HPLC-System auszuwählen, und stellt verschiedene Arten der Systeme vor.
1 Einstellung des Zielvolumens für Fraktionen
Die Auswahl des Instruments und der Säule wird erheblich von dem erforderlichen Fraktionsvolumen beeinflusst. Prüfen Sie präparative HPLCs, indem Sie das minimale Fraktionsvolumen bestimmen, das benötigt wird.
2 Hochskalierung
• Überprüfung der Zusammensetzung des Eluents
• Grundprinzipien der Hochskalierung
• Auswahl des Instruments und der Säule
Einführung in präparative Systeme abhänging vom Zweck
| Fraktionierung zur strukturellen Analyse Reinigung von Biochemikalien Reinigung für die Produktfertigung |
 |
Fraktionierung von mehreren mg Konventionelle HPLC (wiederholte Fraktionierungsoperationen) Fraktionierung von mehreren hundert mg Semi-präparatives System Fraktionierung von mehreren Gramm Großmaßstäbliches präparatives System |
| Fraktionierung bei hoher Reinheit (Überprüfen Sie das Molekulargewicht, wenn möglich.) |
|
Verbesserte Reinigungseffizienz mit ELSD oder LCMS LCMS/ELSD präparatives System Hohe Trennung, die dem Anstieg der Säulenlänge entspricht Vorbereitendes Recyclingsystem |
| Kostengünstige Fraktionierung | |
Ergebnisse, die dem mehrerer Säulen aus einer einzigen Säule entsprechen Vorbereitendes Recyclingsystem |
| Untersuchung von Bedingungen und Überprüfung der Reinheit mit einem einzelnen System | |
Analyse und Fraktionierung mit einem einzelnen System, indem die Fließleitung umgeschaltet wird Analytisches/präparatives automatisches Umschalt-System |
| Schnelle Überprüfung von Fraktionierungsergebnissen für synthetisierte/reinigte Produkte | |
Überprüfung der Beziehung zwischen den Proben, den Fraktionierungsergebnissen (Chromatogramme, Spektren) und den Fraktionsgefäßen auf einen Blick Offene Lösung |
* Vergessen Sie nicht, Maßnahmen zur Handhabung von Lösemittellecks zu ergreifen.
Ein semi- oder großmaßstäbliches präparatives System verwendet viel Lösungsmittel, sodass Maßnahmen ergriffen werden müssen, um mit Undichtigkeiten umzugehen. Beispielsweise sollte ein Behälter unter dem Kolbenkopf positioniert werden, um die Flüssigkeit aus der Pumpenkolbenabdichtung aufzufangen. Seien Sie besonders vorsichtig, wenn Sie ein brennbares Lösungsmittel verwenden. Empfohlene Maßnahmen umfassen, dass keine Geräte in der Nähe positioniert werden, die eine potenzielle Zündquelle darstellen, und den Ablauftank zu erden, um eine Entzündung durch statische Elektrizität zu verhindern.
