Säulenlebensdauer - Teil 2

Der erste Teil zur Säulenlebensdauer behandelte den generellen Umgang mit einer HPLC-Säule, Vermeidung von Verstopfungen durch Partikel und Kristallisation. Im zweiten Teil werden weitere Faktoren erläutert, die zur Langlebigkeit der Säule beitragen können.

Die meisten Umkehrphasen "kollabieren" bei Betrieb mit reinem Wasser. In der Abbildung wird das Kollabierungsverhalten und die Retentionszeitverschiebung einer konventionellen RP-Phase bei 100% Wasseranteil im Eluenten gezeigt. Die Seitenketten knicken um und die Retention und die Reproduzierbarkeit der Messung fällt ab. Dies ist in den meisten Fällen aber durch ausreichend langes Equilibrieren mit 100% organischer mobiler Phase (z. B. Acetonitril) reversibel.

Möchte man dennoch mit einem sehr hohen Wasseranteil arbeiten, können spezielle Säulen verwendet werden, die häufig mit dem Kürzel AQ gekennzeichnet sind. Diese sind durch eine Vernetzung stabiler gegen 100% Wasseranteil in der mobilen Phase.

2. Lagerung der Säule

• Es ist im Allgemeinen sicher, die gleiche Lagerungslösung zu verwenden, die bei der Auslieferung verwendet wurde (siehe Herstellerangaben).
• Aufzeichnung der Lagerungslösung und der Endnutzungsbedingungen zusammen mit der Säule aufbewahren.
• Einen luftdichten Stopfen in die Enden der Säule schrauben. Nicht zulassen, dass das Verpackungsmaterial austrocknet!
• Die Säule an einem Ort aufbewahren, an dem es nicht zu Erschütterungen oder plötzlichen Temperaturschwankungen kommen kann.

3. Defekte Säule und Vorsäule

In der rechten Abbildung sieht man ein Chromatogramm einer neuen Säule im Vergleich zu einem Chromatogramm einer älteren Säule. Bei der älteren Säule sieht man ein deutliches Fronting aller Peaks.

Um sich ein gutes Bild über die Leistungsfähigkeit der Säule zu machen, können dieselben analytischen Bedingungen, wie in den mit der Säule gelieferten Inspektionsdaten nachgefahren und mit dem Testchromatogramm verglichen werden. Ein guter Parameter als Indikator für die Alterung der Säule ist das stetige Sinken der theoretischen Bodenzahl. Wenn eine Vorsäule verwendet wird, sollte diese entfernt werden und anschließend die Analyse wiederholt werden.